La constante de dissociation (Kd) quantifie l'équilibre entre un ligand (L) libre en solution et lié à un site dans une protéine (EL). Elle correspond à l'affinité qu'a le ligand pour le site de liaison. Les ligands avec une énergie libre d'association plus élevée et plus favorable se lient "plus étroitement" et ont donc une plus grande préférence pour l'état lié. Parce que Kd est défini comme une constante de dissociation, les ligands d'affinité plus élevée ont des valeurs de Kd plus faibles.
Dans l'inhibition compétitive, le substrat et l'inhibiteur ne peuvent pas se lier à l'enzyme en même temps, cela résulte généralement du fait que l'inhibiteur a une affinité pour le site actif d'une enzyme où le substrat se lie également ; le substrat et l'inhibiteur entrent en compétition pour accéder au site actif de l'enzyme. Ce type d'inhibition peut être surmonté par des concentrations suffisamment élevées de substrat (Vmax reste constante), c'est-à-dire en dépassant l'inhibiteur. Cependant, le Km apparent augmentera car il faut une concentration plus élevée du substrat pour atteindre le point Km, soit la moitié de la Vmax. Les inhibiteurs compétitifs ont souvent une structure similaire au substrat réel.